АБИТУРИЕНТУ   СТУДЕНТУ   ВЫПУСКНИКУ   СОТРУДНИКУ   РАСПИСАНИЯ


БИОЛОГИЧЕСКИЙ ФАКУЛЬТЕТ

ГЛАВНАЯ
НАШ ФАКУЛЬТЕТ
ПОСТУПЛЕНИЕ
ПЕРЕВОД И ВОССТАНОВЛЕНИЕ
ОБРАЗОВАНИЕ
Учебно-методическая комиссия
Бакалавриат
Магистратура
Аннотации элективных дисциплин
Аспирантура
Докторантура
Выпускникам 2017
Конкурсы и стипендии
Соц. пакет студента
Вопросы по справкам и документам
НАУКА
ЭТИЧЕСКИЙ КОМИТЕТ
ШКОЛЬНИКАМ И УЧИТЕЛЯМ
СТУДСОВЕТ
БИБЛИОТЕКА
ЭКСПЕРТНАЯ ДЕЯТЕЛЬНОСТЬ
САЧОК
БЛОГ
ТРУДОУСТРОЙСТВО
АДМИНИСТРАЦИЯ
СВЕДЕНИЯ О СПбГУ
ЗЕЛЕНЫЙ КАМПУС

Авторизация
Запомнить меня на этом компьютере
  Забыли свой пароль?
 

Главная / Образование / Магистратура

Магистерские дипломы




Сафина Дина Александровна

Квалификационная работа магистра: "Применение плюрипотентных стволовых клеток в модельных исследованиях индуцированного цирроза печени у мышей"

Аннотация: Плюрипотентные стволовые клетки: эмбриональные стволовые клетки (ЭСК) и индуцированные плюрипотентные стволовые клетки (иПСК) – представляют большой интерес для регенерационной медицины. Однако существует ограничение их клинического применения, связанное с их туморогенностью. В нашей лаборатории разработан метод подавления туморогенности плюрипотентных стволовых клеток (СК), основанный на генетической сенсибилизации плюрипотентных клеток. В геном ЭСК и иПСК вводят «суицидальный ген» – ген тимидинкиназы (ТК) под контролем промотора гена плюрипотентности – Oct4, который поддерживает экспрессию ТК исключительно в недифференцированных клетках. Наличие в клетках тимидинкиназы обуславливает их чувствительность к противовирусному препарату – ганцикловиру, что дает возможность избирательно убивать остаточные плюрипотентные клетки после дифференцировки in vitro и in vivo. Целью данной работы стало: изучить возможность безопасного применения «суицидальных» иПСк и ЭСк в модели химически индуцированного цирроза печени у мышей. В ходе работы была проведена оценка плюрипотентности и туморогенности используемых клеточных линий. Гистологическое исследование тератом, полученных из используемых линий ЭСК и ИПСК доказало плюрипотентность клеток. Результаты теста выявили клоны, не дающие тератом при терапии ганцикловиром. Один из них был выбран для дальнейших экспериментов in vivo. Мышам с CCl4-индуцированным циррозом вводили ИПСК, меченные геном β-галактозидазы, через неделю после введения проводили 7-дневную терапию ганцикловиром и через месяц – гистологическую оценку результатов. Наличие «хоминга» клеток в печень оценивали гистохимически. У 30-60% мышей обнаружены диффузные включения клеток, которые при морфологическом анализе были охарактеризованы как эндотелиоциты и миофибробласты – в гепатоциты дифференцировалось очень небольшое количество клеток. Наличие эндотелиальной дифференцировки было подтверждено иммуногистохимическими методами. Чтобы повысить эффективность хоминга и дифференцировки в гепатоциты плюрипотентных стволовых клеток была отработана быстрая in vitro дифференцировка до стадии предшественников гепатоцитов. Были выбраны и модифицированы две быстрые схемы прямой дифференцировки в культуре. Схема с использованием последовательной смены ростовых факторов: ретиноевой кислоты, bFGF и HGF, и OSM оказалась успешной. В течение недели были получены активно-делящиеся клетки с эпителиальной морфологией, экспрессирующие маркеры ранних гепатоцитов AFP, GATA4, G6P. Полученные клетки можно считать предшественниками гепатоцитов, которые в дальнейшем планируется использовать в in vivo исследованиях без сортировки.

Направление: Биология

Кафедра: Цитологии и Гистологии

Научный руководитель: Томилин А. Н. , доктор биологических наук

Дата защиты: 22-01-2011

Отзыв о магистранте: Дина Александровна Сафина принимает активное участие в научно-исследовательской деятельности моей лаборатории с июля 2008 г. и за истекший период зарекомендовал себя с хорошей стороны как мыслящий студент с широким кругозором и глубокими теоретическими знаниями. В достаточно широком методическом репертуаре Дины имеются как стандартные методы молекулярной биологии (RT-PCR, рестрикционный анализ, лигирование, работа с культурами бактерий), биохимии (электрофорезы, иммуноблоты), некоторые навыки работы с лентивируснвми векторами. Дина также владеет основами культивирования клеток млекопитающих, включая эмбриональные стволовые и индуцированные плюрипотентные стволовые клетки. Особенно хочется отметить уровень владения гистологическими и иммуногистологическими методами, которые Дина активно использовала в ходе работы в моей лаборатории. Дина хорошо ориентируется в русско- и англоязычной научной литературе и способна проводить достаточно серьезный поиск в базе литературных данных и разбор статей различных тематик и представлять его на семинарах (за прошедший период ей проведено по меньшей мере 3 лабораторных семинара). Стоит дополнительно отметить, что помимо исследований в контексте дипломной работы, Дина принимала участие в проекте лаборатории, посвященном получению и изучению свойств иПСК крысы. Ее вклад, в данный проект, заключавшийся в гистологическом анализе тератом, был по достоинству оценен в виде соавторства в одной англоязычной и одной русскоязычной статьях, а также в тезисах на конференциях. Материалы настоящей дипломной работы также войдут в готовящиеся публикации. Хочу также заметить, что я дал положительную характеристику при поступлении Дины в немецкую аспирантуру, что, очевидно, вполне отражает мое позитивное мнение об этом студенте и перспективах его научного роста. По моему глубокому убеждению магистерская дипломная работа Д.А.Сафиной «Применение плюрипотентных стволовых клеток в модельных исследованиях индуцированного цирроза печени у мышей» отвечает всем требованиям, предъявляемым к работам данного типа.

Рецензент: Ефремов А. М.

Рецензия: Работа, представленная Диной Александровной Сафиной, посвящена актуальной проблеме использования плюрипотентных стволовых клеток в терапевтических целях. В настоящее время стволовые клетки вызывают неослабевающий интерес со стороны исследователей. Эмбриональные стволовые клетки из-за особенностей получения, имеют весьма ограниченное применение на практике. Однако относительно недавно был разработан метод получения индуцированных плюрипотентных стволовых клеток, что открыло дорогу перед терапевтическим использованием. Основной проблемой использования стволовых клеток (в особенности ЭСК и ИПСК) является их потенциальная туморогенность. Поэтому, для эффективного и безопасного использования ПК, необходимо разработать подходы для предотвращения этих нежелательных эффектов. Сама диссертационная работа построена весьма традиционно. В коротком введении четко описаны современное состояние вопроса о использовании ЭСК, Цель, стоящую перед ней, Дина Александровна разбила на четыре задачи, начиная от оценки туморогенности суицидальных плюрипотентных стволовых клеток и заканчивая подбором условий для дифференцировки плюрипотентных клеток в гепатоциты. Обзор литературы (как, впрочем, и вся диссертация) изобилует небрежностями в оформлении. Удивляет так же полное отсутствие рисунков и схем в этом разделе. Часто фразы обрываются на средине, что, безусловно, является свидетельством спешки, а не злой воли. Т.к. обзор литературы опирается в первую очередь на иностранные источники, некоторые предложения построены немного абсурдно (что вполне простительно при переводе с английского на русский), и впредь автору стоит задуматься при употреблении таких слов как «непеченочных» и «гены-самоубийцы». Отдельно стоит отметить оформление списка литературные не по алфавиту, а в порядке появления ссылок в тексте. Однако единственный русскоязычный источник поставлен, видимо, под случайным номером. Работа выполнена на достойном методическом уровне. Дина Александровна освоила ряд современных методик работы с ИПСК, однако преуспела и в традиционном гистологическом и гистохимическом подходе. Детальное описание методов дано в разделе "Материалы и методы, Однако и в этой части есть ряд промахов и неточностей. помимо уже примелькавшихся опечаток, отсутствует описание происхождения линии ИПСК, с когорыми работал автор. Многие подписи к рисункам не выделены форматированием или шрифтом (как и во всей диссертации), рисунки (рис. 1) плохого качества и содержат посторонние неподписанные элементы. Раздел результаты заслуживает особого внимания. Каждый результат, представленный в ракете, выглядит обоснованным и логичным. Большое количество схем и иллюстраций делают его весьма насыщенным и доступным для понимания. Нельзя це отметить, что все фотографии препаратов сделаны на хорошем уровне, а их подбор свидетельс гвует о хорошим чувстве цвета у автора. Несмотря на общее приятное впечатление, нельзя не отметить уже привычное отсутствие выделения подписей к фотографиям и ужасающе низкое разрешение рисунка 9. Раздел «Обсуждение результатов» безусловно, самая драматическая часть этой диссертации. Не смотря на достижение поставленных задач, Дина Александровна весьма критично сравнивает их с литературными данными. Такое отступление от традиций и общий минорный тон, на первый взгляд являются недостатком диссертации, Однако я уверен, что способность к самокритике и здравой оценки полученных данных есть в первую очередь свидетельство перфекционизма автора, Критическое отношение к собственной работе, ца мой взгляд, признак не малозначимости результата, а здравомыслия, присущего настоящим учёным. Несмотря на некоторые недостатки, диссертационная магистерская работа Дины Александровны Сафиной является самостоятельным законченным научным исследованием.

Оценка: 5

Аннотации квалификационных работ магистров выпуска 2011г.

Аннотации квалификационных работ магистров выпуска 2012г.

Аннотации квалификационных работ магистров выпуска 2013г.

Аннотации квалификационных работ магистров выпуска 2014г.

Аннотации квалификационных работ магистров выпуска 2015г.

Аннотации квалификационных работ магистров выпуска 2016г.


контакты       карта сайта      почтовый сервер       управление      поддержка

199034, Санкт-Петербург, Университетская наб., 7-9
© Санкт-Петербургский государственный университет, 2006-2017