АБИТУРИЕНТУ   СТУДЕНТУ   ВЫПУСКНИКУ   СОТРУДНИКУ   РАСПИСАНИЯ


БИОЛОГИЧЕСКИЙ ФАКУЛЬТЕТ

ГЛАВНАЯ
НАШ ФАКУЛЬТЕТ
ПОСТУПЛЕНИЕ
ПЕРЕВОД И ВОССТАНОВЛЕНИЕ
ОБРАЗОВАНИЕ
Учебно-методическая комиссия
Бакалавриат
Магистратура
Аннотации элективных дисциплин
Аспирантура
Докторантура
Выпускникам
Конкурсы и стипендии
Соц. пакет студента
Вопросы по справкам и документам
НАУКА
ЭТИЧЕСКИЙ КОМИТЕТ
ШКОЛЬНИКАМ И УЧИТЕЛЯМ
СТУДСОВЕТ
БИБЛИОТЕКА
ЭКСПЕРТНАЯ ДЕЯТЕЛЬНОСТЬ
САЧОК
БЛОГ
ТРУДОУСТРОЙСТВО
АДМИНИСТРАЦИЯ
СВЕДЕНИЯ О СПбГУ
ЗЕЛЕНЫЙ КАМПУС

Авторизация
Запомнить меня на этом компьютере
  Забыли свой пароль?
 

Главная / Образование / Магистратура

Магистерские дипломы




Корнев Антон Анатольевич

Квалификационная работа магистра: "Оптимизация параметров электропорации для трансфекции малых интерферирующих РНК на клеточной линии К562"

Аннотация: Клеточная линия К562 является экспериментальной моделью хронического миелоидного лейкоза. Хронический миелоидный лейкоз (ХМЛ) представляет собой клональное миелопролиферативное заболевание, пусковыми механизмами развития которого являются генетические изменения в полипотентной стволовой клетке приводящие к образованию «химерного» гена BCR-ABL, ответственного за ключевые механизмы трансформации стволовых клеток в клетки ХМЛ. С открытием феномена РНК-интерференции открылась уникальная возможность ингибировать экспрессию определенных генов с помощью малых интерферирующих РНК (миРНК). Эффективная доставка миРНК в клетки-мишени - единственный серьезный барьер для внедрения терапевтических методов на основе миРНК. Целью настоящего исследования являлась оптимизация параметров электропорации для эффективной неразрушающей трансфекции миРНК в клетки К562. Электропорацию проводили с применением разных параметров напряжения электрического поля. Изучение эффективности трансфекции контрольной (комплементарной гену GADPH) флуоресцентно-меченой миРНК (FAM-карбоксифлуоресцеин) в клетки линии К562 осуществляли с применением экспериментально установленных параметров электропорации. Анализ функционального состояния клеток, степени порообразования и эффективности трансфекции миРНК после электропорации производили на проточном цитометре. Визуальное изучение трансфекции контрольной флуоресцентно-меченой миРНК в клетки осуществлялось с применением конфокальной микроскопии. На основании проведенной работы установлены оптимальные параметры плотности клеточной суспензии и напряжения электрического поля, для обеспечения максимального выживания клеток культуры К562. При этом наблюдалось максимальное порообразование в мембранах клеток, с сохранением высокой степени пролиферации клеточной культуры К562. Экспериментально установленные параметры электропорации обеспечивают эффективную трансфекцию контрольной флуоресцентно-меченой миРНК в клетки линии К562.

Направление: Биология

Кафедра: Общей Физиологии

Научный руководитель: Дубина М. В. , доктор медицинских наук

Дата защиты: 18-06-2012

Отзыв о магистранте: Корнев А.А. выполнил дипломную работу на тему: «Оптимизация параметров электропорации для трансфекции малых интерферирующих РНК на клеточной линии К562» на базе лаборатории нанобиотехнологий Санкт¬Петербургского академического университета - научно-образовательного центра нанотехнологий РАН. Соискателем самостоятельно проведен анализ современной отечественной и зарубежной научной литературы, поставлены цель и задачи экспериментальных и компьютерных исследований. Овладение компьютерными технологиями и соответствующими программами позволило Корнееву А.А. разработать уникальные наиболее эффективные последовательности малых интерферирующих РНК (миРНК) к матричной РНК гена BCR-ABL, которые перспективны для последующего их использования в экспериментах in vitro на клеточной линии К562. За время работы в лаборатории нанобиотехнологий Академического Университета Корнев А.А. овладел широким спектром современных биологических методов, необходимых в научно-исследовательской работе (культивирование различных клеточных линий, электропорация in vitro, проточная цитометрия, цитофлуориметрия и конфокальная микроскопия). Им проделана работа в исследовании параметров электропорации для эффективной неразрушающей трансфекции миРНК в клетки К562 in vitro. Проведенная Корневым А.А. оптимизации параметров электропорации позволила увеличить параметры выживаемости клеток и процесса порообразования в мембранах исследуемых клеток. Использование экспериментально установленных параметров электропорации, позволили произвести эффективную трансфекцию контрольной флуоресцентно-меченой миРНК. За время работы Корнев А.А. показал себя доброжелательным и коммуникабельным человеком, пользующимся уважением у сотрудников лаборатории. По уровню полученных научных результатов выпускной квалификационной работы, а также по методической и теоретической подготовке Корнев А.А. заслуживает присвоения степени магистра, а представленная работа - оценки «ОТЛИЧНО».

Рецензент: Зайчик А. М., доктор медицинских наук

Рецензия: В связи с неуклонным ростом онкологических заболеваний одной из наиболее важных проблем физиологии и медицины становится исследование механизмов, лежащих в основе трансформации нормальной клетки в злокачественную с целью создания в последующем принципиально новых методов таргетной терапии, прицельным образом воздействующих на ключевые звенья патогенетической цепи неопластических процессов. Одним из механизмов преобразования здоровой клетки в патологическую (как, например, при хроническом миелолейкозе), является возникновение химерного гена BCR-ABL. В результате данной генной мутации образуется цитоплазматический белок р210, обладающий повышенной тирозинкиназной активностью по сравнению с его физиологическим прототипом - белком р145, следствием чего является потеря контроля над пролиферацией, адгезией и апоптозом и трансформация стволовых клеток в клетки хронического миелолейкоза. Поиски патогенетической терапии были направлены на разработку механизмов, подавляющих экспрессию соответствующего патологического гена. Принципиально новые возможности в этом направлении появились с открытием механизма РНК-интерференции, однако нерешенным оставался вопрос эффективной доставки миРНК в клетки-мишени. Одним из методов доставки миРНК является электропорация, при которой импульсы высокого напряжения временно нарушают билипидный слой мембраны, позволяя чужеродным молекулам пройти в клетку. В связи с этим вполне актуальной и своевременной явилась предпринятая автором попытка исследования и анализа значения изменений параметров электропорации для эффективной трансфекции миРНК (малых интерферирующих РНК) в клетки с целью коррекции генетических дефектов злокачественных клеток на модели клеточной линии К562. Работа А.А. Корнева написана по определенному плану, литературным языком, хорошо иллюстрирована. Во введении отражена актуальность исследуемой проблемы, сформулированы общая цель и конкретные задачи исследования. Обзор литературы является четким обоснованием выбранного направления работы, содержит наиболее важные и современные сведения об исследуемой проблеме, помогает грамотно сформулировать общую цель и решить конкретные задачи работы, критически осмыслен. Указатель литературы содержит 134 источника, из них 3 - отечественных и 131 - зарубежных авторов. В работе использован ряд трудоемких сложных современных (в том числе, нанотехнологических) методов исследования. Все методы информативны и адекватны поставленным задачам. Использованные методы исследования, полученные с их помощью результаты, их статистическая обработка и обсуждение говорят о хорошем ориентировании автора в представленных материалах. Достоверность полученных результатов и выводов не вызывает сомнений, хотя выводы несколько уже проведенного исследования. В работе встречаются немногочисленные опечатки и неудачные выражения. Большой интерес вызывают представленные автором доказательства влияния изменений параметров электропорации на интенсивность порообразования в клетках культуры К562 и их выживаемость. Важно отметить, что в процессе работы установлены оптимальные параметры концентрации клеток и напряжения электрического поля, позволяющие обеспечить наиболее эффективную трансфекцию миРНК в клетки линии К562. В результате исследования, проведенного А.А. Корневым, можно высказать предположение, что создание лечебных препаратов на основе миРНК предоставит уникальную возможность для комбинированной терапии с целенаправленным воздействием на конкретные гены, участвующие в процессе канцерогенеза, что, в свою очередь, позволит затормозить прогрессирование онкологического процесса на более ранних этапах и преодолеть развитие лекарственной резистентности. Таким образом, работа А.А. Корнева представляет собой серьезное научное исследование, соответствующее всем требованиям, предъявляемым к магистерским диссертациям и может быть представлена к защите.

Аннотации квалификационных работ магистров выпуска 2011г.

Аннотации квалификационных работ магистров выпуска 2012г.

Аннотации квалификационных работ магистров выпуска 2013г.

Аннотации квалификационных работ магистров выпуска 2014г.

Аннотации квалификационных работ магистров выпуска 2015г.

Аннотации квалификационных работ магистров выпуска 2016г.


контакты       карта сайта      почтовый сервер       управление      поддержка

199034, Санкт-Петербург, Университетская наб., 7-9
© Санкт-Петербургский государственный университет, 2006-2017