АБИТУРИЕНТУ   СТУДЕНТУ   ВЫПУСКНИКУ   СОТРУДНИКУ   РАСПИСАНИЯ


БИОЛОГИЧЕСКИЙ ФАКУЛЬТЕТ

ГЛАВНАЯ
НАШ ФАКУЛЬТЕТ
ПОСТУПЛЕНИЕ
ПЕРЕВОД И ВОССТАНОВЛЕНИЕ
ОБРАЗОВАНИЕ
Учебно-методическая комиссия
Бакалавриат
Магистратура
Аннотации элективных дисциплин
Аспирантура
Докторантура
Выпускникам 2017
Конкурсы и стипендии
Соц. пакет студента
Вопросы по справкам и документам
НАУКА
ЭТИЧЕСКИЙ КОМИТЕТ
ШКОЛЬНИКАМ И УЧИТЕЛЯМ
СТУДСОВЕТ
БИБЛИОТЕКА
ЭКСПЕРТНАЯ ДЕЯТЕЛЬНОСТЬ
САЧОК
БЛОГ
ТРУДОУСТРОЙСТВО
АДМИНИСТРАЦИЯ
СВЕДЕНИЯ О СПбГУ
ЗЕЛЕНЫЙ КАМПУС

Авторизация
Запомнить меня на этом компьютере
  Забыли свой пароль?
 

Главная / Образование / Магистратура

Магистерские дипломы




Шартукова Мария Александровна

Квалификационная работа магистра: "Конструирование штамма гриппозной вакцины A/Н5N1 методом «обратной генетики»"

Аннотация: Высоко патогенный вирус гриппа птиц циркулирует в популяции птиц и человека на протяжении более чем десяти лет, вызывая смертельные случаи среди людей. В связи с высокой патогенность и изменчивостью вируса гриппа птиц существует необходимость в создании эффективной гриппозной вакцины, способной защитить человеческую популяцию в период пандемии. Целью данного исследования было создание реассортантного штамма гриппозной вакцины A/Курица/ Курган/5/05/delNS1 с помощью методов «обратной генетики». В вакцинном штамме была удалена генетическая последовательность, кодирующая белок NS1, который является главным антагонистом факторов врожденной иммунной системы. Вирусный штамм А/курица/Курган/5/05/delNS1 (6:2 реассортант) был сконструирован на основе вакцинного штамма A/Puerto Rico/8/34 (H1N1) и содержал гены НА, NA от штамма вируса гриппа А/курица/Курган/5/05 (H5N1). Для получения реассортантного штамма была проведена трансфекция клеток Vero набором из 8 двунаправленных экспрессионных плазмид pHW_2006, в которые были клонированы полноразмерные последовательности генетических сегментов, синтезированные на основе последовательностей, полученных из базы данных GeneBank. Вакцинный штамм был способен к репродукции в культуре клеток Vero до высоких титров (до 108,0 ТИД50/мл) и обладал генетической стабильностью при пассировании. На протяжении 5 пассажей сохранялся маркер аттенуации – укороченная нуклеотидная последовательность гена NS. Для проверки безопасности и иммуногенности вакцинного штамма A/Курица/ Курган/5/05/delNS1 при интраназальном применении у мышей проводили двукратную иммунизацию с интервалом в 21 день. Животным вводили 40 мкл вакцинного препарата в дозе 106,2 ТИД50 на животное Контрольной группе вводили эквивалентный объем физиологического раствора. Вакцинный штамм был признан безопасным, так как иммунизация животных не приводила к снижению массы тела, а также к развитию каких-либо клинических симптомов. С помощью методов РТГА и ИФА определена иммуногенность вакцинного штамма. В РТГА наблюдали увеличение титра гемагглютинирующих антител в сыворотках мышей после однократной вакцинации (СГТ=32) и после повторной иммунизации (СГТ=256) в сравнении с базовым уровнем антител до иммунизации (СГТ=6). В ИФА также выявлены достоверные увеличения титра Н5 вирус-специфических IgG после однократной дозы (СГТ=1024) и после двукратной дозы (СГТ=24576) вакцинного препарата A/Курица/Курган/5/05/delNS1 в сравнении с контролем (СГТ=128). Таким образом, полученный в ходе данного исследования рекомбинантный аттенуированный вакцинный штамм А/Курица/Курган5/05/delNS1, является генетически стабильным, безопасным и иммуногенным при интраназальном применении у мышей. Данный штамм может быть рекомендован для дальнейших исследований в качестве вакцинного кандидата против пандемического вируса гриппа птиц A/H5N1.

Направление: Биология

Кафедра: Биохимии

Научный руководитель: Грудинин М. П. , кандидат биологических наук

Дата защиты: 18-06-2012

Отзыв о магистранте: Шартукова Мария Александровна пришла в лабораторию молекулярной вирусологии и генной инженерии ФГБУ «НИИ гриппа» Минздравсоцразвития России в 2010 году и включилась в освоение новых методов и выполнение работы по созданию рекомбинантного штамма вируса гриппа A/H5N1. За время работы в лаборатории Мария Александровна Шартукова освоила различные методы, применяемые в молекулярной вирусологии: рестрикционный анализ, электрофорез в агарозном геле, метод ОТ-ПЦР, а также биохимические, вирусологические и иммунологические методы. Шартукова М.А. принимает участие в международном проекте: «Конструирование рекомбинантного штамма вируса гриппа A/H5N1 на основе классической и обратной генетики» в рамках программы «Разработка вакцины против гриппа A/H5N1 для здравоохранения Республики Казахстан». Мария Александровна Шартукова является исполнительным и доброжелательным человеком. М.А. Шартукова проявила себя как внимательный, ответственный и инициативный исследователь, который способен добиваться поставленных задач. Благодаря хорошему знанию английского языка Мария Александровна постоянно проводит поиск новых литературных данных по теме выполняемой работы. Все это, в целом, характеризует Шартукову Марию Александровну как перспективного молодого исследователя, имеющего опыт работы в области биохимии и молекулярной вирусологии, и позволяет рекомендовать оценить ее магистерскую диссертацию на «Отлично».

Рецензент: Романовская Е. В., кандидат биологических наук

Рецензия: Грипп, несмотря на долгую историю существования и достижения фармакологии и медицины, остается одной из самых насущных медико-социальных проблем современного общества. Пандемии гриппа, вспыхивающие с определенной периодичностью по всему земному шару, каждый раз приносят человеческие и экономические потери. Борьбу с вирусом затрудняет быстрое возникновение новых антигенных вариантов вируса за счет «дрейфа», а также периодическое возниконовение новых штаммов, вызывающих пандемии, за счет реассортации сегментов генома. Одним из опасных подтипов вируса гриппа является досих пор активно циркулирующий среди птиц подтип H5N1, способный вызвать вспышки заболевания с высоким уровнем смертности среди людей. На сегодяшний день основным методом профилактики заболеваний гриппом является вакцинация, однако, в связи с высокой изменчивостью вируса гриппа и отсутствием вакцин, которые вырабатывали бы стойкий иммунитет, необходима разработка новых конкретных вакцин против гриппа. В связи с вышесказанным актуальность и практическая значимость представленной магистерской диссертации, посвященной конструированию вакцинного штамма вируса гриппа А (H5N1) не вызывает сомнений. Магистерская диссертация изложена на 63 стр, построена по стандартному плану и содержит все принятые разделы: введение, обзор литературы, описание методов исследования, результаты исследования, обсуждение результатов. Список литературы содержит 116 ссылок, в основном на зарубежные периодические издания. Список оформлен аккуратно и в соответствии с правилами ГОСТ (хотя мне попалась ссылка, не совпадающая по году публикации со ссылкой в тексте). Во введении обосновывается необходимость и адекватность проводимого диссертантом исследования, в конце (на отдельной странице) сформулированы цели и задачи работы. В своем обзоре литературы, который достаточно внушителен – 26 стр. – автор освещает несколько проблем: морфология и жизненный цикл вируса гриппа (этот раздел можно было бы счесть несколько поверхностным, однако в силу ограниченности объема обзора литературы можно рассматривать эту часть вполне подходящей), роль белка NS1 в патогенности вируса гриппа. В последней части обзора литературы автор рассматривает основные направления в разработке противогриппозных вакцин, существующие в настоящее время. Методы, используемые Шартуковой для решения поставленных задач, разделены на три группы – вирусологические, иммунологические и молекулярно-генетические (правильнее их назвать молекулярно-биологическими). Испольуемые методики вполне адекватны, описаны в диссертации достаточно подробно, кроме тех случаев, когда автор использует коммерческие наборы (можно было указать хотя бы основные этапы методов). Серьезным недочетом можно считать отсутствие ссылок на литературные источники в этом разделе. Результаты диссертационного исследования проиллюстрированы таблицей и 12 рисунками. Автор провел накопление и проверку рестрикционным анализом восьми коммерческих плазмид, содержащих восемь различных геномных сегментов вируса гриппа А двух штаммов. Приведенные электрофореграммы в целом свидетельствуют о выполнении данной задачи, однако на них не видно выщепляемого эндонуклеазой рестрикции Sma 1 фрагмента в 100 п.н. К недостаткам оформление этого раздела можно отнести наличие так называемых «висячих строк» – заголовков в конце страницы. Успешность формирования штамма-реассортанта после трансфекции клеток Vero автором подтверждена наличием цитопатического эффекта – разрушением клеточного монослоя. Была показана генетическая стабильность полученного штамма на протяжении 5 пассажей, а также его безопасность и иммуногенность у мышей. В разделе «Обсуждение результатов» Шартуковой М.А. описываются достоинства избранной вакцины, возможность ее применения. В связи с этим хотелось бы услышать мнение автора о преимуществах используемого им подхода по сравнению со считающимися перспективными для высоко изменчивых вирусов и широко обсуждаемыми в научном мире ДНК-вакцинами. Выводы соответствуют полученным результатам, сформулированы четко и конкретно и свидетельствуют о выполнении автором поставленных задач. В целом магистерская диссертация производит очень хорошее впечатление, написана грамотно, содержит мало ошибок и опечаток. По объему проделанного эксперимента, арсеналу использованных методов и представлению работа Шартуковой М.А. отвечает всем требованиям, предъявляемым к выпускным квалификационным работам – магистерским диссертациям и безусловно заслуживает оценки «отлично».

Аннотации квалификационных работ магистров выпуска 2011г.

Аннотации квалификационных работ магистров выпуска 2012г.

Аннотации квалификационных работ магистров выпуска 2013г.

Аннотации квалификационных работ магистров выпуска 2014г.

Аннотации квалификационных работ магистров выпуска 2015г.

Аннотации квалификационных работ магистров выпуска 2016г.


контакты       карта сайта      почтовый сервер       управление      поддержка

199034, Санкт-Петербург, Университетская наб., 7-9
© Санкт-Петербургский государственный университет, 2006-2017