АБИТУРИЕНТУ   СТУДЕНТУ   ВЫПУСКНИКУ   СОТРУДНИКУ   РАСПИСАНИЯ


БИОЛОГИЧЕСКИЙ ФАКУЛЬТЕТ

ГЛАВНАЯ
НАШ ФАКУЛЬТЕТ
ПОСТУПЛЕНИЕ
ПЕРЕВОД И ВОССТАНОВЛЕНИЕ
ОБРАЗОВАНИЕ
Учебно-методическая комиссия
Бакалавриат
Магистратура
Аннотации элективных дисциплин
Аспирантура
Докторантура
Выпускникам 2017
Конкурсы и стипендии
Соц. пакет студента
Вопросы по справкам и документам
НАУКА
ЭТИЧЕСКИЙ КОМИТЕТ
ШКОЛЬНИКАМ И УЧИТЕЛЯМ
СТУДСОВЕТ
БИБЛИОТЕКА
ЭКСПЕРТНАЯ ДЕЯТЕЛЬНОСТЬ
САЧОК
БЛОГ
ТРУДОУСТРОЙСТВО
АДМИНИСТРАЦИЯ
СВЕДЕНИЯ О СПбГУ
ЗЕЛЕНЫЙ КАМПУС

Авторизация
Запомнить меня на этом компьютере
  Забыли свой пароль?
 

Главная / Образование / Магистратура

Магистерские дипломы




Чыонг Чан Ван

Квалификационная работа магистра: "Минисателлит UPS29 как модулятор экспресии репортерного гена EGFP в исследованиях на культуре клеток F9"

Аннотация: В лаборатории молекулярной цитогенетики развития млекопитающих отдела Молекулярной генетики НИИ Экспериментальной медицины СЗО РАМН исследуют ассоциацию раннего развития болезни Паркинсона (БП) с различными аллелями низковариабельного минисателлита UPS29, расположенного в одном из интронов гена ACAP3, кодирующего белок CENTB5 из семейства центауринов бета. Изменения в характере экспрессии генов, кодирующих белки этого семейства, были показаны для целого ряда нейродегенеративных заболеваний. Группой ранее была установлена зависимость повышенного риска раннего развития БП от наличия коротких аллелей минисателлита. Целью настоящей работы была оценка влияния различных аллелей минисателлита UPS29 на экспрессию репортерного гена EGFP после интеграции в геном клеток линии F9 мышиной эмбриональной карциномы. Для достижения поставленной цели нами были сформулированы следующие задачи: 1.Изучение уровня экспрессии репортерного гена (интенсивности флуоресценции EGFP) в трансфектных клетках F9 с помощью лазерной сканирующей конфокальной микроскопии; 2.Проведение 2D FISH на препаратах метафазных хромосом для определения сайта встраивания; 3.Постановка 3D FISH для определения положения встроенной конструкции в ядре относительно поверхности ядра и хромоцентров; 4.Проведение 3D иммуно-FISH с антителами к acH3K9 и Dnmt-1 для определения статуса активности хроматина в месте интеграции. Мы трансфицировали клетки F9 конструкциями, несущими репортерный ген (улучшенный белок зеленой флуоресценции, EGFP) под универсальным промотором ROSA26, в пять штрих положении к которому был вставлен один из трех вариантов аллелей UPS29: полная последовательность интрона, содержащая длинную аллель; длинная аллель из 17-ти повторов; короткая аллель из 6-ти повторов, ассоциированная у человека с ранним развитием болезни Паркинсона. Для каждой аллели проведены не менее 5-ти независимых трансфекций для оценки влияния сайта интеграции, контролем выступали клетки, трансфицированные конструкцией без вставки UPS29. Показано, что независимо от сайта интеграции все аллельные варианты оказывают репрессорное воздействие на экспрессию гена EGFP, с наиболее выраженным эффектом для короткой аллели. Для локализации сайтов интеграции использовали 2D FISH на препаратах метафазных хромосом, полученных фиксацией метанолом с уксусной кислотой. В случае с одной из трансфекций конструкцией с длинной аллелью, FISH-сигналы были выявлены на маркерной метацентрической хромосоме. Эта линия была использована для дальнейшего анализа с помощью 3D FISH расстояния от сайта интеграции до границы ядра и до ближайшего хромоцентра в интерфазных ядрах. FISH-сигнал локализовался преимущественно на периферии ядра, при этом ассоциация между сайтом интеграции с поверхностью ядра или границами хромоцентров отсутствовала. По результатам работы сформулированы следующие выводы: 1. Короткая аллель UPS29 оказывает наиболее выраженное репрессирующее действие на уровень экспрессии репортерного гена в использованной модели; 2. Интеграция конструкции с длинной (нормальной) аллелью UPS29 не приводит к образованию новой зоны гетерохроматинизации в сайте интеграции.

Направление: Биология

Кафедра: Генетики и Селекции

Научный руководитель:

Дата защиты: 05-12-2011

Аннотации квалификационных работ магистров выпуска 2011г.

Аннотации квалификационных работ магистров выпуска 2012г.

Аннотации квалификационных работ магистров выпуска 2013г.

Аннотации квалификационных работ магистров выпуска 2014г.

Аннотации квалификационных работ магистров выпуска 2015г.

Аннотации квалификационных работ магистров выпуска 2016г.


контакты       карта сайта      почтовый сервер       управление      поддержка

199034, Санкт-Петербург, Университетская наб., 7-9
© Санкт-Петербургский государственный университет, 2006-2017