АБИТУРИЕНТУ   СТУДЕНТУ   ВЫПУСКНИКУ   СОТРУДНИКУ   РАСПИСАНИЯ


БИОЛОГИЧЕСКИЙ ФАКУЛЬТЕТ

ГЛАВНАЯ
НАШ ФАКУЛЬТЕТ
ПОСТУПЛЕНИЕ
ПЕРЕВОД И ВОССТАНОВЛЕНИЕ
ОБРАЗОВАНИЕ
Учебно-методическая комиссия
Бакалавриат
Магистратура
Аннотации элективных дисциплин
Аспирантура
Докторантура
Выпускникам
Конкурсы и стипендии
Соц. пакет студента
Вопросы по справкам и документам
НАУКА
ЭТИЧЕСКИЙ КОМИТЕТ
ШКОЛЬНИКАМ И УЧИТЕЛЯМ
СТУДСОВЕТ
БИБЛИОТЕКА
ЭКСПЕРТНАЯ ДЕЯТЕЛЬНОСТЬ
САЧОК
БЛОГ
ТРУДОУСТРОЙСТВО
АДМИНИСТРАЦИЯ
СВЕДЕНИЯ О СПбГУ
ЗЕЛЕНЫЙ КАМПУС

Авторизация
Запомнить меня на этом компьютере
  Забыли свой пароль?
 

Главная / Образование / Магистратура

Магистерские дипломы




Шехова Елена Александровна

Квалификационная работа магистра: "Изучение взаимодействия маннозо-связывающего лектина с миелопероксидазой человека"

Аннотация: Маннозо-связывающий лектин (МСЛ) является одной из ключевых рецепторных молекул системы врожденного иммунитета. Распознавание им углеводных лигандов на поверхности микробных клеток приводит к активации системы комплемента по лектиновому пути. Миелопероксидаза (МПО) участвует в эффекторной стадии реакций врожденного иммунитета, катализируя образование токсичных для микробов молекул. Две группы литературных данных позволили нам предположить, что молекулы МСЛ и МПО способны взаимодействовать с формированием комплекса, который потенциально может играть важную роль в защитных реакциях организма. МПО является гликопротеином и содержит олигосахаридные компоненты, оканчивающиеся остатками маннозы, что нехарактерно для большинства гликопротеинов млекопитающих. Структура МСЛ включает коллагеноподобный домен, а из литературы известно, что МПО образует комплекс с коллагеновыми фибриллами и с C1q компонентом комплемента, который также содержит коллагеноподобный домен. Таким образом, потенциально возможно взаимодействие МПО и МСЛ как углевод-лектиновой, так и белок-белковой природы. Такой комплекс может играть важную роль в реакциях врожденного иммунитета, совмещая рецепторные и эффекторные функции в физически единой структуре. Целью данной работы было изучение in vitro взаимодействия МПО и МСЛ. Для достижения данной цели были поставлены следующие задачи: 1) Выделить МСЛ человека в функционально активном состоянии; 2) Изучить возможность формирования комплекса МСЛ с МПО in vitro метод градиентного электрофореза; 3) Изучить возможность осуществления взаимодействия между МСЛ и МПО в зависимости от условий среды (присутствия ионов Ca2+, маннанов); 4) Изучить влияние МСЛ на пероксидазную активность МПО. Хроматографическими методами был получен препарат МСЛ в функционально активном состоянии. При помощи градиентного электрофореза без детергентов при нейтральном значении pH показано что МСЛ и МПО образуют комплекс, независимо от наличия в среде ионов кальция. А присутствие в среде маннанов приводит к изменению электрофоретической подвижности комплексов МПО с различными белками: маннозо-связывающим лектином и церулоплазмином (ЦП). Влияние МСЛ на пероксидазную активность МПО исследовали в реакции окисления орто-дианизидина. Как оказалось, при инкубации с МСЛ в присутствии ЭДТА происходит увеличение пероксидазной активности МПО при различных значениях pH (pH 7,4; pH 5), кроме того, МСЛ частично отменяет ингибирующее действие ЦП на пероксидазную активность МПО. Результаты данной работы подтвердили наше предположение о формировании комплекса между МСЛ и МПО in vitro в условиях, характеризующихся физиологическими значениями pH и ионной силы. Вместе с тем, было показано, что образование комплекса не зависит от наличия в среде ионов кальция. Это означает, что взаимодействие углевод-связывающих доменов МСЛ с олигосахаридными компонентами МПО не является необходимым для формирования комплекса между данными белками. Наши результаты также свидетельствуют о возможности белок-белкового взаимодействия между МПО с МСЛ, которое индуцирует конформационные изменения в молекуле фермента, приводящие к увеличению его ферментативной активности, однако дополнительные взаимодействия МПО и МСЛ через олигосахаридные цепочки и углевод-распознающие домены могут блокировать такие трансформации.

Направление: Биология

Кафедра: Биохимии

Научный руководитель: Берлов М. Н. , кандидат биологических наук

Дата защиты: 07-12-2011

Отзыв о магистранте: Шехова Е.А. пришла в лабораторию общей патологии НИИ экспериментальной медицины в 2010-м году. За период работы над выпускной квалификационной работой бакалавра Шехова Е.А. зарекомендовала себя человеком, искренне увлеченным наукой, способным систематически и самостоятельно вести исследования, постоянно интересующимся новейшими теоретическими и методическими достижениями биологии. Она овладела современными методами препаративной и аналитической белковой химии, что позволило ей стать полноправным участником комплексных научных исследований, проводимых в лаборатории. В коллективе Шехова Е.А. поддерживает хорошие отношения с коллегами и пользуется их уважением. По итогам научной работы Шехова Е.А. стала соавтором двух научных публикаций, включая статью в реферируемом журнале (Вестник Санкт-Петербургского университета). Резюмируя все вышесказанное, можно охарактеризовать Шехову Е.А. как квалифицированного молодого специалиста, способного к самостоятельной научно-исследовательской работе.

Рецензент: Рогачева О. Н., кандидат биологических наук

Рецензия: Рецензируемая работа посвящена изучению формирования комплекса между двумя ключевыми молекулами системы врожденного иммунитета: маннозо-связывающим лектином (МСЛ) и миелопероксидазой (МПО), а также анализу изменения свойств этого комплекса в зависимости от условий окружающей среды. Важно отметить, что предположение о существовании взаимодействия между МСЛ и МПО не взято из литературы, а выдвигается автором работы, что ставит научную новизну предпринятого исследования вне всякого сомнения. Известно, что, находясь в составе комплекса, белки изменяют свои свойства и функции, то есть белковый комплекс является способом регуляции активности образующих его белков. Более того, модулирование свойств комплекса факторами окружающей среды значительно расширяет границы такой регуляции и широко используется в живых системах. Поэтому установление факта существования ранее неизвестного межмолекулярного взаимодействия всегда представляет большой интерес для науки. В данном конкретном случае комплекс образуют молекулы, играющие ключевые роли в процессах воспаления, вследствие чего высока вероятность участия исследуемого комплекса в обеспечении эффективности иммунного ответа. Таким образом, в перспективе можно говорить не только о фундаментальном значении работы, но и о возможности применения ее результатов в медицине. Работа построена по традиционному плану и включает в себя разделы «Введение», «Обзор литературы», «Материалы и методы», «Результаты и обсуждение», «Заключение», «Выводы» и «Список литературы». Объединение результатов и их обсуждений в один раздел в данном случае представляется целесообразным, так как анализ предыдущих результатов каждый раз объясняет необходимость постановки последующих опытов. Работа изложена на 58 страницах и содержит 29 рисунков. В списке литературы приводятся ссылки на 91 работу, причем среди них есть как оригинальные статьи 40-х годов прошлого века, так и последние работы, вышедшие в 2011 году, что свидетельствует о глубоком изучении автором исследуемого вопроса. В разделе «Введение» обосновывается актуальность выбранной темы, и приводятся литературные данные, ставшие предпосылкой выдвижение гипотезы о взаимодействии МСЛ и МПО. Также во введении формулируются цель и задачи исследования. Раздел «Обзор литературы» разбит на два больших подраздела, посвященных соответственно МСЛ и МПО. Структура обоих подразделов абсолютно одинакова, что делает обзор логичным и удобным для чтения. В каждом из подразделов дается детальное изложение строения, свойств и биологических функций рассматриваемого белка, а также приводятся сведения по патологиям связанным с ним. Важной чертой обзора является краткое описание всех известных белков, с которыми, исходя из литературных данных, взаимодействуют МПО и МСЛ. В разделе «Материалы и методы» детально описаны все методы, используемые в исследованиях. Порядок изложения методов совпадает с порядком применения их в работе, что еще до ознакомления с результатами дает представление о плане эксперимента Раздел «Результаты и обсуждение» посвящен изложению экспериментальных результатов, полученных автором, и их анализу в свете имеющихся литературных данных. Благодаря проделанной работе теперь уже научно доказанным фактом является возможность существования комплекса между МСЛ и МПО, причем важным результатом работы является установление природы этого комплекса. Именно белок-белковые взаимодействия удерживают МСЛ и МПО вместе, однако с большой долей вероятности дополнительные углевод-белковые взаимодействия, то разрушающиеся, то образующиеся при разных условиях, могут изменять свойства комплекса. В разделе «Заключение» подводится итог под полученными результатами и обсуждается возможность участия комплекса МСЛ и МПО в иммунном ответе. Также в данном разделе предлагаются дальнейшие пути развития начатого исследования Выводы работы корректны и логически вытекают из полученных результатов. Говоря о работе Шеховой Е.А., отдельно хочется отметить стиль изложения материала. Текст написан четким профессиональным языком последовательно и логично, благодаря чему читается довольно легко. Работа в целом оформлена очень аккуратно, однако присутствуют мелкие недочеты. Например, в разделе «Обзор литературы» отсутствует расшифровка англоязычных аббревиатур, встречающихся на рисунках. В ходе ознакомления с работой возникли следующие вопросы: 1) Все данные по белок-белковому взаимодействию МСЛ и МПО получены с использованием легкой формы МСЛ. Насколько вероятно, что МПО также будет связывать его тяжелую форму? 2) В одном из экспериментов для изучения природы связывания МСЛ и МПО используются маннаны. В аналогичном опыте МСЛ заменяется церулоплазмином – белком, способным связывать МПО, но не способным взаимодействовать с углеводами. Гипотезы, объясняющие возможную структуру получившихся в данных условиях белковых или же белок-углеводных комплексов, излагаются в тексте диссертации несколько запутанно. Поэтому хотелось бы услышать более четкое мнение автора по этому вопросу. В целом же можно отметить, что работа Шеховой Е.А. выполнена на очень высоком уровне. Изложенные в рецензии замечания и вопросы не являются принципиальными и не влияют на общее положительное впечатление от работы. Она полностью соответствует требованиям к магистерским диссертациям и, несомненно, заслуживает оценки "отлично".

Оценка: 5

Аннотации квалификационных работ магистров выпуска 2011г.

Аннотации квалификационных работ магистров выпуска 2012г.

Аннотации квалификационных работ магистров выпуска 2013г.

Аннотации квалификационных работ магистров выпуска 2014г.

Аннотации квалификационных работ магистров выпуска 2015г.

Аннотации квалификационных работ магистров выпуска 2016г.


контакты       карта сайта      почтовый сервер       управление      поддержка

199034, Санкт-Петербург, Университетская наб., 7-9
© Санкт-Петербургский государственный университет, 2006-2017