Биологический факультет СПбГУ

биофак СПбГУ


Тимофеев Сергей Александрович

Квалификационная работа магистра: "Секреторные белки микроспоридий как инструмент воздействия на клетку насекомого-хозяина."

Аннотация: Секреция белков в клетку хозяина является одним из основных механизмов прямого регулирующего воздействия внутриклеточных эукариотических паразитов на клетку и организм своего хозяина. У представителей таксонов внутриклеточных паразитов Apicomplexa и Kinetoplastida подобные белковые факторы патогенности являются предметом активного изучения в последние десятилетия. До не давнего времени практически полностью отсутствовали данные о подобных механизмах у многочисленной и всесветно распространенной группы внутриклеточных паразитов – микроспоридий. Данные родственные грибам организмы поражают представителей практически всех систематических групп от протистов до млекопитающих, на сегодняшний день описано 15 видов микроспоридий, способных заражать человека. Данная работа посвящена идентификации, локализации и функциональному анализу секреторных белков микроспоридий на примере паразито-хозяинной системы: микроспоридия Paranosema locustae – саранча Locusta migratoria. В рамках работы были получены следующие результаты: 1. Гетерологичная экспрессия факторов P. locustae  в дрожжевых грибах Pichia pastoris в совокупности с полученными ранее данными иммуноблотинга зараженной ткани позволила идентифицировать 5 белков паразита, секретируемых им в клетку хозяина – саранчи Locusta migratoria: трегалазу, гексокиназу, α/β-гидролазу, и два LRR-белка. 2. С помощью метало-хелатной хроматографии показано, что один из LRR белков P. locustae специфично связывается с высокомолекулярным белковым комплексом в цитоплазме зараженной клетки L. migratoria, вероятно являющимся компонентом сигнального или регуляторного пути клетки хозяина. 3. Оценка влияния экспрессии α/β-гидролазы P. locustae на липидный состав дрожжевых клеток позволила сделать вывод о липолитической активности белка в отношении запасных триглицеридов жирового тела саранчи и его участии в интенсификации обменных процессов клетки хозяина. 4. Измерение ферментативной активности, гексокиназы P. locustae в совокупности с полученными ранее данными о локализации в клетке хозяина, позволили предположить, что данный белок выполняет различные функции на разных стадиях жизненного цикла микроспоридии. В спорах паразита данный фермент катализирует первую реакцию гликолиза. После внедрения патогена в клетку хозяина данный белок становится секретируемым фактором, который поступает в ядро зараженной клетки и, наиболее вероятно, воздействует на экспрессию генов хозяина. Полученные данные свидетельствуют о важной роли секретируемых белков микроспоридий в целенаправленном воздействии на физиологические и молекулярно-генетические процессы зараженной клетки насекомого-хозяина.



Направление: Биология

Кафедра: Зоологии беспозвоночных

Научный руководитель: к.б.н. Долгих Вячеслав Васильевич

Отзыв научного руководителя


Рецензент: Соколова Ю.Я.

Рецензия

Дата защиты: 9-06-2015



© Биологический факультет СПбГУ, 2006-2011